SDS定制(sds定制选品是什么东西)

威武短视频 2022年06月16日 04:06 204 威武短视频

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关于免疫印迹western blotting的若干愚昧问题

1.转膜有两个原因，最主要的原因是凝胶里的蛋白质吸附是非常疏松的，在封闭和包被抗体的时候你的蛋白都会掉下来的。只有用膜牢牢吸附住才能把蛋白固定下来。

另外，聚丙烯酰胺凝胶的强度实在是太差了，根本经不起后面封闭，砸抗体，显影等的操作，一扯一晃会散架的......就算不散架也会有很严重的变形。

还有就是把内部的蛋白转出来，转到膜的表面可以增加吸附抗体的效率。不过要说蛋白质在凝胶中完全不暴露在外有点过头了，蛋白质一般比DNA分子量小，带的电荷也少，扩散更容易，其实是能够结合外面的抗体的。但是转到膜的表面能增加效率是一定的。

2.很久以前最原始的Western办法是只用一次抗体的。只用一次抗体的缺点是，这个抗体必须定制，就是说要做什么蛋白的Western就得手工在它的抗体上接上HRP辣根过氧化物酶，每次Western的抗体不同，就得重新构建一次抗体。

蛋白重组是个技术活，做起来不容易，成功率也不高。每做一次Western都得先干一两年的蛋白重组的活，这周期和成本也太恐怖了！

所以后来就对构建HRP的抗体进行批量化工业化生产，想到的办法就是我的抗体不需要每次针对一个新的蛋白啊，只要针对某一大类的IgG就行了，再用这类IgG中的不同靶向的抗体株去结合不同的蛋白质。这样，抗体跟HRP的结合变成了批量化工业化生产，把Western实验的成本和周期大大降低了。

当然，二抗还有一个好处，就是级联放大，砸第二次抗体可以把信号再次放大成百上千倍，能大大提高整个实验的灵敏度。

3.我是在南大读硕士，我们很少看别的书，就是看《分子克隆》（科学出版社，J.萨姆布鲁克DW拉塞尔著黄培堂等译）一本

SDS定制(sds定制选品是什么东西) 第1张

国内的普源做的不错，那是因为普源之前一直是安捷伦DSO3000A示波器的OEM代工。

国外的话，三大品牌：安捷伦、泰克、力科。目前还存在竞争的就是安捷伦与泰克。

如果从性能上来讲，安捷伦是优于泰克的。特别是高端的示波器，如安捷伦的DSO9000A系列，以及带宽上升到8个GHz以上的示波器，安捷伦都是完全优于泰克的。今年安捷伦更是推出了32个G的实时带宽示波器，这一点泰克就做不到了。。。Intel、迈威等全球的芯片巨头，用的都是安捷伦的示波器。

09年之前泰克用的还是十年前的技术，到了今年10月份的时候才又重新推出新产品“熊猫”。但是由于安捷伦的重心一直在射频产品那一块，所以示波器的市场占有率泰克占优。目前泰克的市场占有率在50%左右，安捷伦40%左右。

SDS定制(sds定制选品是什么东西) 第2张

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